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蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒

簡要描述:蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品.為客戶全面解決實驗、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2024-05-08
  • 訪  問  量:301

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒

 微量法 100管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義

蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向"器官運輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應(yīng)酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性對于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意義。

測定原理

SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

試劑的組成和配制

提取液液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;

試劑二: 液體5mL×1瓶,4℃保存;

試劑三:粉劑×2支,-20℃保存;臨用前每支加入1.2mL試劑二充分溶解待用,現(xiàn)配現(xiàn)用;

試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。

 

樣品測定的準(zhǔn)備: 

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

  1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

  2. 樣本測定,(在EP管中依次加入下列試劑):

試劑名稱(μL)

測定管

對照管

樣本

10

10

試劑三

40


試劑一


40

混勻,30℃準(zhǔn)確水浴30min后,95℃水浴10min

試劑四

50

50

95℃水浴5min左右,冷卻至室溫

蒸餾水

400

400

混勻,取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中,540nm下測定各管

吸光值。ΔA=A測定-A對照。每個測定管需要設(shè)一個對照管。

SS-Ⅰ活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0012x - 0.0492;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/mL),y為ΔA。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)= (ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T

=138.9×(ΔA+0.0492) ÷Cpr

3、按照樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =(ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=138.9×(ΔA+0.0492) ÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.05mL; V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。

b.96孔板測定的計算公式如下

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 0.0006x - 0.0492;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/mL),y為ΔA。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)= (ΔA+0.0492) ÷0.0006×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T

=277.8×(ΔA+0.0492) ÷Cpr

3、按照樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。

SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =(ΔA+0.0492) ÷0.0006×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T

=277.8×(ΔA+0.0492) ÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.05mL; V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

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  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價格。

蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒

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